Standard Operating Procedures

操作规范

配子处理、受精、胚胎评估的标准操作流程。

卵子处理

取卵后处理

  • 37°C恒温台上快速筛选卵子
  • 梯度离心法去除血细胞和碎片
  • 评估卵子成熟度(MI、MII、GV)
  • 仅对MII卵子进行受精

脱颗粒细胞

ICSI前需去除卵子周围的颗粒细胞,便于评估和注射。常用方法: 透明质酸酶消化 + 机械剥离。

精子处理

密度梯度离心法

标准方法,可获得高活力、低DNA碎片率的精子:

  • 精液液化后 layering 于梯度液上层
  • 300g离心20分钟
  • 沉淀洗涤后重悬

上游法

适用于精液质量较好者,精子活力筛选效果佳,但回收率较低。

胚胎评估

胚胎评估是选择移植胚胎的关键,需每日定时观察并记录。

  • D1:观察原核(2PN),评估受精
  • D2-3:评估卵裂球数目、大小均一性、碎片比例
  • D5-6:评估囊胚扩张程度、ICM、滋养层

评估时机:应在每日固定时间评估,避免因发育时间不同造成的偏差。